在线观看网站-国产综合av-欧美日本亚洲-国精产品一区一区三区免费视频-久久久精品在线-色哟哟在线-国产福利视频在线-国产乱人伦精品一区二区-a级片黄色-无码精品人妻一区二区三区湄公河-午夜丁香婷婷-午夜精品久久久久久久蜜桃-欧美永久-国产aⅴ一区二区三区-琪琪色视频

技術文章您現在的位置:首頁 > 技術文章 > 自動誘導超級肉湯培養基 Super Broth

自動誘導超級肉湯培養基 Super Broth

更新時間:2023-02-28   點擊次數:2454次

自動誘導超級肉湯培養基Super Broth產品描述:

自動誘導超級肉湯培養基(Autoinductive Super Broth)也稱自動誘導SB,用于大腸桿菌Lac啟動子驅動的的重組蛋白表達,無需添加IPTG。自誘導培養基能夠獲得高細胞密度,蛋白表達率高出IPTG誘導過程好幾倍。

SB自動誘導培養基工作原理

SB培養基由于其高密度的營養成分,非常適合重組大腸桿菌的快速生長。超級肉湯培養基是一種加富培養基,配方基于TB培養基(Terrific Broth),后者由LB培養基改進而來,目的是達到高細胞密度。E. coli在該培養基中生長速度快于其在LB培養基或 2x YT肉湯中的生長速度。SB培養基被認為是很佳的質粒擴增培養基。一般來說,在液體培養基中大腸桿菌細胞生長的質量如下:LB Broth < 2x YT Broth < Terrific Broth < Super Broth。

該培養基中含有理想比例的葡萄糖和α-乳糖作為碳源和能量來源。胰蛋白胨提供氮源、維生素、礦物質和氨基酸,這些營養成分是細胞生長所必需的。酵母提取物是豐富的B族維生素來源。Studier salts為細菌細胞的生長提供很佳的生理環境。

通常,外源蛋白在細菌中表達時常使用IPTG誘導的啟動子,如Lac啟動子。當細胞密度達到理想值時,通過向培養基中加入IPTG的方法誘導蛋白表達。使用這個自動誘導培養基,不再需要監測細胞密度和添加IPTG。葡萄糖作為半乳糖操縱子的阻遏因子阻止細菌利用α-乳糖,而被優先代謝,促進高密度生長。一旦培養基中的葡萄糖被耗盡(通常發生在對數期的后期),乳糖被?-半乳糖苷酶轉換成異乳糖(葡萄糖-1,6-半乳糖),而后者作為IPTG誘導型啟動子的誘導劑,引起乳糖阻遏子從與DNA結合的位點上釋放,啟動重組蛋白的表達。對于DE3基因型的E.coli中,異乳糖使T7lac啟動子去阻遏,并誘導lacUV5啟動子表達T7 RNA聚合酶。通過這種方式,在細菌培養物生長到某一特定點時蛋白表達自發開始,去掉了監測細胞密度(OD600)和添加IPTG這兩個步驟。與傳統IPTG誘導的蛋白表達過程相比,使用自動誘導培養基極大地方便和簡化了試驗流程。


使用步驟:

1. 稱取74.85 脫水培養基粉末,用1L去離子水加熱溶解。

2. 煮沸1min。

3. 115°C 滅菌20min。

不要過度加熱,避免乳糖分解和培養基顏色加深。冷卻后保存在2-8oC,如果不染菌,可以保存2個月左右。


Quantity: 500g

Appearance: Beige powder. Autoclaved medium should be amber.

Storage: 2oC – 25oC. When not in use, keep container closed to avoid hydration.


配方Formulation (g/L)

Tryptone: 35.00

Yeast Extract: 20.00

MgSO4: 0,15

(NH4) 2SO4: 3,30

KH2PO4: 6,80

Na2HPO4: 7,10

Glucose 0,50

Alpha Lactose 2,00

Final pH (25oC): 7,0 ± 0,2


配置Preparation:

Add 45,85g of the dehydrated medium to one liter of distilled water. Mix well and dissolve by heating with regular agitation. Boil for 1 minute in order to dissolve completely. Dispense in appropriate containers and sterilize by autoclaving at 121oC for 15 to 20 minutes. Store at 2oC to 8oC.


使用Usage

Commonly, heterologous protein expression is carried out in bacterial systems where the expression is under the control of an IPTG-inducible promoter, such as the Lac promoter. Cells are grown until a desired density and protein expression is subsequently induced by adding IPTG to the medium. With this Auto Induction Medium (AIM), it is no longer required to monitor cell density and to add IPTG at the proper stage, as the medium contains an optimized ratio of glucose and alpha lactose as carbon sources. Glucose, who serves as a repressor of the Lac operon, by preventing uptake of alpha lactose (hence and IPTG) is metabolized preferentially during growth, promoting high cell density. Once glucose is depleted, usually in mid to late log phase, lactose enters the cell where it is converted by ?galactosidase into allolactose, which in turn serves as the inducer of the IPTG-inducible promoter, resulting in protein expression. This is a great convenience and simplifies manual or automatic induction and analysis of multiple clones compared to conventional IPTG  induction.


靶點科技(北京)有限公司

靶點科技(北京)有限公司

地址:中關村生命科學園北清創意園2-4樓2層

© 2025 版權所有:靶點科技(北京)有限公司  備案號:京ICP備18027329號-2  總訪問量:353792  站點地圖  技術支持:化工儀器網  管理登陸

主站蜘蛛池模板: 精品国模一区二区三区 | 成年人三级视频 | 动漫羞羞 | 国产乱色精品成人免费视频 | 亚洲精品一区二区三区中文字幕 | www.日本色 | 精品亚洲永久免费 | 禁片天堂 | 视频在线观看91 | 乱日视频| 天天干天天爱天天射 | jzzijzzij亚洲成熟少妇 | 国产精品污www一区二区三区 | 中文字幕69| 国内精品嫩模av私拍在线观看 | 欧美黑人又粗又大又爽免费 | 日韩av在线观看免费 | 免费观看毛片网站 | 欧美日韩少妇 | 97国产精品 | 国产精品天美传媒入口 | 福利免费观看 | 欧美一级二级三级 | 天堂va蜜桃 | 亚洲美女自拍偷拍 | 国产综合婷婷 | 色婷婷综合网 | 欧美日皮视频 | 亚洲欧洲免费 | 国产做爰全免费的视频软件 | 国产一级一级国产 | 欧美小视频在线观看 | 久久久精品毛片 | 天天久久久 | 最近中文字幕免费mv视频7 | 欧美日韩国产第一页 | 色多多视频在线 | 国产精品揄拍100视频 | 国产人妖一区二区三区 | 国产专区一区二区三区 | 草比网站| 亚洲欧美日韩综合在线 | 亚洲精品视频免费看 | 日韩一三区 | 国产寡妇亲子伦一区二区三区四区 | a级片网址 | n0659极腔濑亚美莉在线播放播放 | 草视频在线 | 亚洲国产欧美一区 | 冲田杏梨一区二区三区 | 国产精品毛片久久久 | 欧美成人乱码一区二区三区 | 国产视频亚洲 | 日本精品中文字幕 | 中国毛片基地 | 中文字幕第3页 | 少妇久久久久久久久久 | 麻豆精品免费视频 | 久久伊人色 | 亚洲乱码一区 | 天天拍天天操 | 色丁香综合 | 99热在线只有精品 | 亚洲播放器| 美女被到爽高潮视频 | 欧美a在线看| 欧美日韩精品中文字幕 | 国产一区二区三区视频免费观看 | 香蕉视频97 | 国产福利在线播放 | 欧美成人性生活视频 | 中文字幕在线看人 | 成人麻豆视频 | 久操综合 | 羞辱狗奴的句子有哪些 | 日日射天天干 | 欧美福利片在线观看 | 韩国av中文字幕 | 国产免费久久精品国产传媒 | av不卡在线免费观看 | 99久| 亚洲视频中文字幕 | 黄色一级免费 | v99av| 在线观看日韩视频 | 淫语视频 | 国产一级片网址 | 一区二区三区在线视频播放 | 三级成人网 | 成人免费观看av | 国产成人免费观看 | 香蕉久久一区二区三区 | 国产av精国产传媒 | 538国产精品视频一区二区 | 国产美女明星三级做爰 | 欧美视频在线一区二区三区 | 久久精品10| 性欧美精品男男 | 激情文学综合网 |